一 、準備工作
微柱凝膠試劑卡的準備 ：觀察外觀 ，如有幹膠 、雜質 、氣泡不可使用 ，之後將卡放置室溫（18－25℃）平衡 ，再用專用離心機離心5分鍾 。
（二）檢測標本的準備 ：
1．紅細胞懸液的製備 ：將受血者與獻血者的紅細胞和血漿分離 ，各取其壓積紅細胞10ul ，分別加入含1.0－1.2毫升紅細胞稀釋液的兩個試管中 ，外觀應為均勻淡紅色 ，無絮狀物和血塊 。
2．血清標本的製備 ：采集被檢對象靜脈血 ，放入含兔腦粉或其它促凝劑的試管中 ，10分鍾後離心 ，取上清 。
二 、操作步驟
1．將準備好的抗人球蛋白交叉配血卡做好標記 。
2．將獻血者紅細胞懸液1滴（或50μl）與受血者血清1滴（或50μl）先後加入主側管中 。
3．將受血者紅細胞懸液1滴（或50μl）與獻血者血清1滴（或50μl）先後加入次側管中 。
4．加樣後的試劑卡 ，置37℃孵育器中孵育15分鍾 。
5．使用專用離心機離心5分鍾（900rpm2分鍾 ，1500 rpm3分鍾） ，取出肉眼觀察結果 。
結果判定 ：
1．陰性結果 ：紅細胞完全沉降於凝膠管底部 ，表明受血者與獻血者血型相合 。
2．陽性結果 ：紅細胞凝集塊位於凝膠表麵或凝膠中 ，表明受血者與獻血者血型不相合 。
三 、注意事項
1．應用直接抗人球蛋白微柱凝膠免疫試驗檢測病人紅細胞時 ，一定要用適量EDTA的試管采血液標本 ，該標本不能放入4℃-10℃冰箱保存 ，以避免紅細胞在病人體外致敏所致假陽性反應 。
2．紅細胞標本一定不能被細菌汙染 ，否則出現假陽性反應 。盡可能應用當日采集的新鮮血做本試驗 。如不得不用過夜血或陳舊血 ，則必須首先用該標本做陰性對照試驗 ，以確定該標本是否可以做本實驗 。
3．血清標本 ：血清標本必須充分去纖維蛋白 ，否則標本中纖維蛋白在微柱凝膠中析出 ，阻礙陰性紅細胞沉澱 ，呈假陽性反應 。
4．如在微柱凝膠管中出現溶血現象 ，強烈提示為紅細胞抗原抗體陽性反應 ，也不排除其他原因所致溶血 ，故對此標本一定認真分析 ，並向上級主管技術人員報告並討論其原因 。
5．每日試驗前 ，先取出微柱凝膠卡放置至室溫 。
6．試劑卡應放在18-25℃儲存 ，如若長期放在4℃冰箱 ，建議每1-2個月取出 ，用專用離心機離心一次 ，以防止幹膠或產生氣泡 。
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